Micobactérias, Identificação de cepa, cepa de microrganismo

Orientações para o cliente

I - Informações gerais

• Este exame permite a identificação de espécies de micobactérias crescidas em meio de cultura.

II - Amostras crescidas em meio sólido, frasco MycoFLytic ou MBBact

• É necessário informar o material clínico do qual a bactéria foi originalmente isolada, nome, sexo e idade do paciente, assim como data da cultura original, pois tais informações são incluídas no laudo. Para as amostras ambientais, não há necessidade de fornecer esses dados.
• Amostras crescidas em placa de Petri não devem ser enviadas devido ao risco biológico do transporte.
• Crescimentos bacterianos precisam ser encaminhados em tubo de ensaio plástico ou em frasco plástico com tampa rosqueada.
• Os frascos têm de ser envolvidos com papel absorvente e colocados em saco plástico transparente, o qual deve ser vedado com fita adesiva.
• O transporte de material biológico precisa ser feito em recipiente de alumínio com tampa rosqueada ou em recipiente plástico hermético.
• Na face externa do recipiente, é necessário colocar uma etiqueta que identifique a remessa como 'amostra de micobactéria para identificação'.

Orientações necessárias

I - Informações gerais

• Este exame permite a identificação de espécies de micobactérias crescidas em meio de cultura.

II - Amostras crescidas em meio sólido, frasco MycoFLytic ou MBBact

• É necessário informar o material clínico do qual a bactéria foi originalmente isolada, nome, sexo e idade do paciente, assim como data da cultura original, pois tais informações são incluídas no laudo. Para as amostras ambientais, não há necessidade de fornecer esses dados.
• Amostras crescidas em placa de Petri não devem ser enviadas devido ao risco biológico do transporte.
• Crescimentos bacterianos precisam ser encaminhados em tubo de ensaio plástico ou em frasco plástico com tampa rosqueada.
• Os frascos têm de ser envolvidos com papel absorvente e colocados em saco plástico transparente, o qual deve ser vedado com fita adesiva.
• O transporte de material biológico precisa ser feito em recipiente de alumínio com tampa rosqueada ou em recipiente plástico hermético.
• Na face externa do recipiente, é necessário colocar uma etiqueta que identifique a remessa como 'amostra de micobactéria para identificação'.

Processamento e adequação da amostra

• Ao receber um recipiente com etiqueta externa AMOSTRA DE MICOBACTÉRIA PARA IDENTIFICAÇÃO ou uma solicitação para o exame IDBK, seguir o passo a passo:

1- Não abrir o recipiente (de alumínio ou de plástico);

2- Acondicionar as etiquetas e o recipiente em saco plástico;

3- Enviar o material em temperatura ambiente para o setor de Microbiologia.

• A adequação da amostra será avaliada pelo setor técnico.

Método

• Sequenciamento de DNA.

Interpretação e comentários

• Para a identificação das micobactérias de crescimento rápido, o Fleury realiza o sequenciamento parcial do gene rpoB e, para as de crescimento lento, o sequenciamento parcial do gene hsp65.
• Em culturas em meio líquido, o gene sequenciado é o hsp65. Já nos casos inconclusivos, o sequenciamento envolve o gene que codifica o rRNA 16S.
• As espécies do complexo Mycobacterium tuberculosis não são diferenciadas rotineiramente. Caso haja interesse na diferenciação entre M. bovis selvagem e M. bovis BCG, o clínico deve entrar em contato com a assessoria médica da Microbiologia. Nessa situação, a caracterização é realizada por PCR multiplex.