DETECÇÃO DE RESISTÊNCIA, EM MYCOPLASMA GENITALIUM, Vários Materiais

Orientações para o cliente

" - Não é necessário preparo para este exame.

• Esse teste é aplicável a amostras com detecção de Mycoplasma genitalium com suspeita de resistência aos antimicrobianos (macrolídeos e fluoroquinolonas).
• Para amostras com baixa quantidade das bactérias é possível que o resultado seja inconclusivo por falha no método de sequenciamento.
• Não é possível realizar o exame em pessoas sem resultado prévio positivo de M. genitalium (resultado prévio negativo ou indetectado).

Orientações necessárias

" - Não é necessário preparo para este exame.

• Esse teste é aplicável a amostras com detecção de Mycoplasma genitalium para direcionamento da terapia antimicrobiana.
• Para amostras com baixa quantidade das bactérias é possível que o resultado seja inconclusivo por falha no método de sequenciamento.
• Não é possível realizar o exame em pessoas sem resultado prévio positivo de M. genitalium (resultado prévio negativo ou indetectado).

Método

Sequenciamento por eletroforese capilar (método Sanger) dos genes 23S rRNA (A2058 e A2059) e parC (G248 e G259).

Processamento e adequação da amostra

"ATENÇÃO:

É possível solicitar a inclusão de XDRMYCOPLAG se o exame para detecção de M. genitalium foi realizado internamente, teve resultado positivo e, NO MÁXIMO, até 20 dias após emissão do laudo. As amostras positivas ficarão armazenadas no setor de BMO durante esse período. Se o período for superior a 20 dias, deve-se realizar nova coleta (coletar apenas uma amostra e abrir MYCOPLASMAPCR e XDRMYCOPLAG).

1) Material raspado endocervical ou vaginal

Enviar o material à seção, em temperatura ambiente.

2) Material urina primeiro jato

Após receber o frasco plástico descartável com o material de urina de primeiro jato coletada, deve-se verificar se o volume está adequado (10 - 30mL). Caso esteja acima ou abaixo do volume especificado, comunicar o setor responsável (BMO).

• Enviar a amostra em tubo cônico estéril de tampa azul refrigerada. Mínimo 6 ml.
• A mesma amostra (única) pode ser utilizada para todos estes exames: CLAMDNA, NEISSDNA, UREAPLPCR, MYCOPLASMAPCR, XDRMYCOPLAG, TRICHOPCR, URIN1J, WUR1J e GRAMUR1J.
• Para os exames CLAMDNA e NEISSDNA, aliquotar e enviar no frasco Cobas PCR urine media.
• Para os exames MYCOPLASMAPCR, XDRMYCOPLAG, UREAPLPCR e TRICHOPCR enviar no frasco estéril. Caso sejam solicitados URIN1J, WUR1J e GRAMUR1J, a amostra deve ser dividida em três (3) alíquotas: Microbiologia, Urinálise e Métodos Moleculares.

ESTABILIDADE DA AMOSTRA

As amostras endocervical e vaginal são estáveis:

Temperatura ambiente: 7 dias;

Refrigerado (2-8 ºC): 15 dias.

A urina primeiro jato é estável nas seguintes condições:

Temperatura ambiente: 24 horas

Refrigerado (2 a 8ºC): 7 dias;

Congelado (-20ºC): 30 dias.

Valor de referência

Ausência de mutações de resistência.

Interpretação e comentários

"A resistência aos antimicrobianos é uma questão emergente no tratamento das infecções causadas por M. genitalium em todo o mundo, com significativas variações regionais. A pesquisa molecular de genes relacionados à resistência bacteriana é preconizada pela literatura especializada, no intuito de instituir o tratamento antimicrobiano direcionado e mitigar o desenvolvimento de resistência bacteriana (resistance-guided therapy). A presença de mutações genéticas nos genes 23S rRNA e parC conferem, respectivamente, resistência aos macrolídeos (azitromicina) e as quinolonas (moxifloxacina). O exame é realizado por meio de sequenciamento por eletroforese capilar (método Sanger) das principais regiões envolvidas com a resistência: gene 23S rRNA (A2058 e A2059) e gene parC (G248 e G259). Resultados da validação interna mostraram alta prevalência da mutação A2059 do gene 23S rRNA na população avaliada. Esse teste auxilia na decisão da escolha terapêutica, tanto no tratamento antimicrobiano inicial quanto na falha terapêutica ou recorrência, das infecções por M. genitalium. Para informações adicionais consultar: Durukan, D. et al. Clin Infect Dis. 2020 Sep 12;71(6):1461-1468.