DETECÇÃO MOLECULAR DE MULTIRRESISTÊNCIA PARA M, TUBERCULOSIS, Vários Materiais

Orientações para o cliente

Este exame detecta a presença de Mycobacterium tuberculosis e, simultaneamente, avalia a resistência à isoniazida, fluoroquinolonas, etionamida, amicacina, canamicina e capreomicina. O exame é realizado nos seguintes materiais: escarro, lavado broncoalveolar, secreção traqueal e cepas isoladas de M. tuberculosis.

Escarro

É necessário retirar o frasco estéril apropriado e as instruções de coleta em uma das unidades de atendimento, uma vez que a amostra deve ser colhida em casa.

O cliente precisa entregar o material até uma hora após a coleta, caso a amostra permaneça em temperatura ambiente, ou em 72 horas, se estiver refrigerada (2ºC-8ºC).

Secreção traqueal

• A coleta deve ser realizada somente em unidades hospitalares.

Lavado broncoalveolar

A amostra deve ser coletada pelo próprio médico assistente. Deve ser entregue no laboratório em até uma hora após a coleta, caso permaneça em temperatura ambiente, ou em 72 horas, se estiver refrigerada (2ºC-8ºC)

ATENÇÃO : Material enviado

• Crescimentos bacterianos em meio líquido podem ser encaminhado com volume mínimo 2 mL.
• Crescimentos bacterianos em meio sólidos ou líquidos precisam ser encaminhados em tubo de ensaio plástico ou em frasco plástico com tampa rosqueada.
• Os frascos têm de ser envolvidos com papel absorvente e colocados em saco plástico transparente, o qual deve ser vedado com fita adesiva.
• O transporte de material biológico precisa ser feito em recipiente de alumínio com tampa rosqueada ou em recipiente plástico hermético.
• Na face externa do recipiente, é necessário colocar uma etiqueta que identifique a remessa como 'amostra de micobactéria para identificação' e contenha ainda o nome do cliente, a discriminação do material clínico e o número no laboratório de origem.

Orientações necessárias

Este exame detecta a presença de Mycobacterium tuberculosis e, simultaneamente, avalia a resistência à isoniazida, fluoroquinolonas, etionamida, amicacina, canamicina e capreomicina. O exame é realizado nos seguintes materiais: escarro, lavado broncoalveolar, secreção traqueal e cepas isoladas de M. tuberculosis.

Escarro

É necessário retirar o frasco estéril apropriado e as instruções de coleta em uma das unidades de atendimento, uma vez que a amostra deve ser colhida em casa.

O cliente precisa entregar o material até uma hora após a coleta, caso a amostra permaneça em temperatura ambiente, ou em 72 horas, se estiver refrigerada (2ºC-8ºC).

Secreção traqueal

• A coleta deve ser realizada somente em unidades hospitalares.

Lavado broncoalveolar

A amostra deve ser coletada pelo próprio médico assistente. Deve ser entregue no laboratório em até uma hora após a coleta, caso permaneça em temperatura ambiente, ou em 72 horas, se estiver refrigerada (2ºC-8ºC)

ATENÇÃO : Material enviado

• Crescimentos bacterianos em meio líquido podem ser encaminhado com volume mínimo 2 mL.
• Crescimentos bacterianos em meio sólidos ou líquidos precisam ser encaminhados em tubo de ensaio plástico ou em frasco plástico com tampa rosqueada.
• Os frascos têm de ser envolvidos com papel absorvente e colocados em saco plástico transparente, o qual deve ser vedado com fita adesiva.
• O transporte de material biológico precisa ser feito em recipiente de alumínio com tampa rosqueada ou em recipiente plástico hermético.
• Na face externa do recipiente, é necessário colocar uma etiqueta que identifique a remessa como 'amostra de micobactéria para identificação' e contenha ainda o nome do cliente, a discriminação do material clínico e o número no laboratório de origem.

Processamento e adequação da amostra

"Este exame pode ser realizado em amostras de escarro, lavado broncoalveolar, secreção traqueal e cepas de M. tuberculosis.

• Escarro, secreção traqueal ou lavado broncoalveolar: mínimo de 2 mL em frasco estéril.
• Cepas de microrgarnismos não devem ser manipulados devem ser enviados no frasco apropriado e encaminhados em temperatura ambiente.

ESTABILIDADE DA AMOSTRA

• Escarro, secreção traqueal ou lavado broncoalveolar: refrigerada (2 ºC a 8ºC) por 72 horas.
• CEPAS DE M. tuberculosis Cultura líquida MGIT™ Growth Supplement: temperatura ambiente por 72 horas.

Método

PCR em tempo real - GeneXpert.

Valor de referência

Não detectado

Interpretação e comentários

O Xpert® MTB/XDR é um teste rápido molecular, qualitativo e foi desenvolvido para a identificação do Complexo Mycobacterium tuberculosis multirresistente. A detecção e caracterização do alvo são realizadas por meio da PCR nested em Tempo Real, utilizando um sistema fechado (o ensaio conta com 1 alvo para a detecção do Complexo Mycobacterium tuberculosis, 7 alvos para detecção de resistência a medicamentos e 1 alvo para controle interno).

O desempenho analítico do Xpert® MTB/XDR foi avaliado em estudo clínico [Cao et al, J Clin Microbiol. 2021; Feb 18;59(3):e02314-20]. A sensibilidade e especificidade observadas para detecção de resistência a medicamentos em amostras de escarro, quando comparado ao padrão de referência fenotípico, foi de 85,7% e 97,75%, respectivamente.

O ensaio fornece resultados precisos para a detecção de resistência a medicamentos, entretanto, possui algumas limitações. O teste foi desenhado para detectar as mutações mais frequentemente associadas à isonizida, etionamida, fluoroquinolonas, amicacina, canamicina e capreomicina, a presença de novas mutações ou deleções em qualquer um dos genes alvo, ou outros mecanismos de resistências não correlacionados às mutações, podem levar a um resultado indeterminado ou falsa-sensibilidade para um medicamento específico. Além disso, em amostras com população bacteriana mista - de cepas susceptíveis e cepas resistentes - característica conhecida como heterorresistência - a detecção da resistência molecular depende da quantidade de cepas resistentes presentes na amostra analisada.

Desta maneira é fundamental que o resultado desse teste seja analisado conjuntamente com o teste de sensibilidade fenotípico, através das técnicas clássicas de microbiologia.