FISH PARA SARCOMA, DE EWING, bloco de parafina

Orientações para o cliente

I - Exame:

• Este exame é realizado em neoplasias ósseas ou de partes moles para auxiliar o diagnóstico do sarcoma de Ewing, Sarcoma de Células Claras entre outras.
• Materiais colhidos fora do Fleury podem ser enviados em bloco de parafina, com a cópia do laudo original, ou em formol 10% tamponado.
• Para que o teste tenha maior chance de sucesso é recomendado que o tecido seja fixado o mais rápido possível após o procedimento cirúrgico e a permanência do material no formol seja de no mínimo seis horas e no máximo 48 horas.
• É necessário apresentar pedido médico e laudo anatomopatológico.

Orientações necessárias

I - Exame:

• Este exame é realizado em neoplasias ósseas ou de partes moles para auxiliar o diagnóstico do sarcoma de Ewing, Sarcoma de Células Claras entre outras.
• Materiais colhidos fora do Fleury podem ser enviados em bloco de parafina, com a cópia do laudo original, ou em formol 10% tamponado.
• Para que o teste tenha maior chance de sucesso é recomendado que o tecido seja fixado o mais rápido possível após o procedimento cirúrgico e a permanência do material no formol seja de no mínimo seis horas e no máximo 48 horas.
• É necessário apresentar pedido médico e laudo anatomopatológico.

Processamento e adequação da amostra

Distribuição:

Encaminhar o(s) bloco(s) de parafina enviado(s) ou amostra processada no Laboratório juntamente com a solicitação médica, laudo anatomopatológico (quando o material não tiver sido analisado no Fleury) à Anatomia Patológica.

AP (Anatomia Patológica):

Informação sobre o preparo das lâminas:

-- Não passar as lâminas em estufa;

-- Enviar 2 lâminas em branco com cortes de 4 micras em lâmina carregada positivamente (preferência lâminas TOMO – Roche) + 1 HE.

Estabilidade:

Temperatura ambiente (20-25°C): por tempo indeterminado.

Método

A análise é feita por hibridação in situ por fluorescência (Fish), uma técnica citogenética baseada no uso de sondas de DNA, marcadas com fluorocromo, que se ligam ao DNA-alvo complementar.

O exame utiliza sondas de DNA dual color LSI EWSR1(22q12), do tipo break apart, para a identificação do rearranjo 22q12, uma das quais ligada à porção 5' do gene EWS e a outra, à porção 3'.

Valor de referência

Os núcleos que não apresentam rearranjo evidenciam dois sinais amarelos, causados pela justaposição das sondas. Por sua vez, os núcleos anormais demonstram dois sinais separados (verde e vermelho), indicando a ocorrência do rearranjo. O teste não identifica o gene parceiro da fusão.

Interpretação e comentários

O sarcoma de Ewing faz parte da família de tumores EWS e podem ocorrer nos ossos e em partes moles. Caracterizam-se por alterações cromossômicas recorrentes, resultantes da fusão do gene EWS, localizado no cromossomo 22, com um dos vários genes da família de fatores de transcrição ETS. A fusão mais comum ocorre com o gene FLI1, estando presente em aproximadamente 85% dos casos, como resultado da translocação t(11;22)(q24;q12). Entretanto, em cerca de 5% dos casos, o gene EWS está envolvido em translocações com os genes ERG t(21;22) e ETV1 t(7;22).