Leishmania, Detecção do DNA por PCR, Vários Materiais

Orientações para o cliente

EXAME:

• Não é necessário preparo para este exame.
• Este exame detecta as diversas espécies de Leishmania causadoras de doença cutânea, mucosa e visceral, sem, no entanto, diferenciá-las.

Material de biópsia - MATERIAL RECEBIDO:

• O(s) fragmento(s) deve(m) ser acondicionado(s) em frasco universal com tampa de rosquear, contendo etanol 70% em quantidade suficente para cobri-lo(s).
• Fragmentos de lesões diferentes devem ser acondicionados em frascos separados. Nesse caso, deve ser cadastrado e cobrado um exame para cada lesão.
• Não serão aceitas amostras conservadas em formol.
• A amostra deve ser mantida refrigerada e, deve ser enviada ao laboratório no mesmo dia da coleta.

ATENÇÃO: Em caso de Biópsia, devido à baixa estabilidade, NÃO realizar coletas em emendas e vésperas de feriado. "

Orientações necessárias

EXAME:

• Não é necessário preparo para este exame.
• Este exame detecta as diversas espécies de Leishmania causadoras de doença cutânea, mucosa e visceral, sem, no entanto, diferenciá-las.

Material de biópsia - coleta e recebimento:

• O(s) fragmento(s) deve(m) ser acondicionado(s) em frasco universal com tampa de rosquear, contendo etanol 70% em quantidade suficente para cobri-lo(s).
• Fragmentos de lesões diferentes devem ser acondicionados em frascos separados.
• Não serão aceitas amostras conservadas em formol.
• A amostra deve ser mantida refrigerada e, deve ser enviada ao laboratório no mesmo dia da coleta. Procedimento de coleta não deve ser realizado em vésperas de feriados devido à baixa estabilidade deste tipo da amostra. "

Valor de referência

NÃO DETECTADO (NEGATIVO)

Limite de Detecção: 1.000 cópias/mL

Interpretação e comentários

A Leishmaniose é uma doença parasitária causada por protozoários do gênero Leishmania,  transmitidos pela picada mosquitos do grupo dos flebotomos, que são normalmente encontrados nas regiões tropicais e subtropicais do mundo.  Os reservatórios da Leishmania incluem roedores, cães e seres humanos infectados. Várias espécies do gênero são agentes etiológicos da leishmaniose visceral, cutânea e mucocutânea.  A leishmaniose visceral ou Calazar é, essencialmente, causada pelo complexo donovani que inclui; a Leishmania donovani, a Leishmania infantum e a Leishmania chagasi.  A leishmaniose visceral é fatal na ausência de tratamento e as drogas atualmente disponíveis são caras e causam sérios efeitos colaterais.  Vários estudos têm demonstrado que a PCR (reação em cadeia da polimerase) é altamente específica e mais sensível do que métodos clássicos utilizados para o diagnóstico da leishmaniose.  A detecção do DNA da Leishmania sp em sangue periférico está associada ao nível de parasitemia e pode ser negativa mesmo em pacientes com o diagnóstico parasitológico confirmado.

Método

PCR (Reação em Cadeia Da Polimerase) em Tempo Real

Processamento e adequação da amostra

"SANGUE: Enviar o próprio tubo de coleta, com mínimo de 1 mL de sangue total, refrigerado. NÃO CONGELAR.

MEDULA: Enviar o próprio tubo de coleta, com mínimo de 0,5 mL de medula, refrigerado. NÃO CONGELAR.

BIÓPSIA: Receber material em frasco universal com tampa de rosquear, contendo etanol 70% em quantidade suficiente para cobrir o(s) fragmento(s). Enviar refrigerado ao LARI/LARN. NÃO aceitar amostras acondicionadas em formol.

IMPORTANTE: Fragmentos de lesões diferentes deverão ser acondicionados em frascos separados. Nesse caso, será cadastrado e cobrado um exame para cada lesão.

Estabilidade da amostra:

• Sangue total e aspirado de medula:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2º a 8ºC): 5 dias;

Congelada (-20ºC): não aceitável.

• Biópsia:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2º a 8ºC): Enviar refrigerado em etanol, preferencialmente no mesmo dia da coleta. (após esse período, todas as amostras serão avaliadas pelo laboratório para a viabilidade de realização do teste no material recebido).

Congelada (-20ºC): não aceitável.